模型提供两种脂肪肝造模手段:高脂饲喂诱导饮食型脂肪肝;四氯化碳、硫代乙酰胺染毒损伤肝细胞,构建化学性脂肪肝。幼鱼通体透明,可直观观察肝脂变性、肝损伤及氧化炎症,评价样品保肝降脂、干预脂肪肝功效。
联系我们1.实验原理
本模型支持两种经典造模方式,既可通过高脂饲料持续饲喂斑马鱼,模拟人类高热量饮食摄入引发肝脏脂质过度蓄积,构建饮食源性非酒精性脂肪肝;也可使用四氯化碳、硫代乙酰胺等化学试剂暴露染毒,直接损伤肝细胞线粒体与内质网,造成肝细胞坏死与脂质代谢紊乱,继发形成化学损伤型非酒精性脂肪肝。依托斑马鱼幼鱼通体透明的特点,可直观观测肝脏脂肪变性、肝组织损伤与氧化炎症应激状态,用于评价受试物对非酒精性脂肪肝的干预与保肝降脂效果。
2.检测指标
(1)油红 O 脂质染色阳性区域面积
(2)qPCR 检测脂肪酸合成基因 FASN、脂肪酸氧化基因 CPT1A、脂代谢调控基因 PPARα、凋亡基因 Bax、炎性因子 TNF-α、DNA 损伤应答基因 p53 的 mRNA 相对表达量
3.实验结果
模型对照组斑马鱼肝脏出现大面积脂质堆积,肝功能指标异常升高,机体氧化应激与炎症反应被激活,肝脏脂代谢稳态严重失衡;经受试样品处理干预后,肝脏脂肪浸润程度明显减轻,肝损伤标志物与氧化损伤产物含量显著下降,下调脂肪酸合成、细胞凋亡及炎症相关基因表达,同时激活肝脏脂肪酸氧化通路,改善肝脏脂质代谢紊乱,表明该样品可拮抗高脂饮食或化学毒物损伤所诱发的非酒精性脂肪肝病变。
4.阳性对照药
多烯磷脂酰胆碱

图1.脂质油红O染色面积

图2.脂代谢、肝凋亡相关关键基因PPARα mRNA表达量
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